혈장 샘플의 전처리 방법

생의학 연구, 약물 분석 및 임상 진단 분야에서 혈장 샘플은 분석의 주제로서 중요한 역할을합니다. 혈액의 액체 부분 인 혈장은 단백질, 지질, 대사 산물 및 가능한 약물 잔기를 포함한 다양한 생물학적 분자가 풍부합니다. 그러나, 이러한 풍부한 성분은 또한 분석적 문제를 제시한다.이 물질들 중 다수는 간섭 요인으로 작용하여 목표 분석 물의 정확한 결정에 영향을 미칩니다. 따라서, 혈장 샘플의 전처리는 실험 결과의 신뢰성과 정확성을 보장하는 핵심 링크가되었다.

1. 일반적인 치료 방법 1. 항 응고 및 혈장 수집 : 전체 항 응고 혈액을 수집 한 후에는 충분한 항 응고를 보장하기 위해이를 부드럽게 반전시킨 후, 혈장은 저속으로 직접 원심 분리 될 수 있습니다 (또는 약 30 분 동안 서있을 수 있습니다). 원심 분리 할 때, 용혈을 피하기 위해 적절한 원심력 및 시간을 선택해야한다. 실험실에서 일반적으로 사용되는 항응고제에는 다양한 헤파린, EDTA 및 시트산 나트륨 염이 포함되며, 실험 요구에 따라 적절한 항응고제를 선택해야합니다. 2. 저온 동결 : 분리 된 혈장은 냉동 및 저장 될 수 있지만, 해동 후 응집성 탁도가 발생하면 원심 분리 한 다음 측정해야합니다.

2. 간섭 물질을 제거하는 방법 1. 희석 및 가열 방법 : 혈장은 용해 된 물로 3 ~ 10 회 희석 된 다음 37 내지 100 ℃에서 가열된다. 이 방법은 특정 열 민감한 간섭 물질의 함량을 제거하거나 줄일 수 있습니다. 2. 클로로포름 추출 방법 : 혈장에 같은 양의 클로로포름을 추가하고 일정 기간 (예 : 3 시간)을 진동 한 다음 테스트를 위해 상부 층을 복용합니다. 클로로포름은 특정 지방 가용성 간섭 물질을 효과적으로 추출하고 분리 할 수 ​​있습니다. 3. 에테르 처리 방법 : 혈장을 에테르에 첨가하고 적절한 온도 (예 : 40 ° C)에서 절연 한 다음 에테르를 제거합니다. 에테르는 혈장에서 특정 휘발성 간섭 물질을 제거하거나 감소시킬 수 있습니다. 4. 트리 플루오로 아세트산 방법 : 아세트산을 혈장에 첨가하여 pH를 4.0으로 조정 한 다음 K2HPO4를 사용하여 pH를 7 ~ 7.5로 조정합니다. 이 방법은 혈장의 산-염기 환경을 변화시켜 특정 간섭 물질의 안정성과 활성에 영향을 줄 수 있습니다. 5. 계면 활성제 처리 방법 : 희석 가열 방법과 유사하지만 희석 물은 계면 활성제로 변경된다. 계면 활성제는 혈장의 특정 막 구조를 파괴하여 막에 감싸는 간섭 물질을 방출 할 수 있습니다. 6. 겔 여과 방법 : 겔의 분자 체를 사용하여 혈장에서 다른 분자 크기의 물질을 분리하십시오. 이 방법은 거대 분자 간섭 물질을 효과적으로 제거 할 수 있습니다. 7. 알칼리성 처리 방법 : 혈장은 일정 기간 (예 : 10 분) 동안 적절한 온도 (예 : 37 ℃)에서 특정 농도의 알칼리 (예 : 0.2N NAOH)와 함께 배양 한 다음 산 (예 : HCL)으로 중화시킨다. 알칼리성 환경은 특정 간섭 물질의 화학적 특성을 변화시켜 활동을 쉽게 제거하거나 줄일 수 있습니다. 8. 비드 방법 : 특수한 수지를 흡착하는 특정 간섭 물질 (예 : 수지 흡착 내 독소)을 혈장에 넣고 완전히 흡착 될 때까지 기다린 다음 후속 반응에 적합한 시약을 추가하십시오. 이 방법은 혈장에서 특정 간섭 물질의 제거를 목표로 할 수 있습니다.

3. 특정 표적에 대한 전처리 방법 혈장 샘플의 전처리가 특정 표적 (예 : 약한 알칼리성 약물)을 결정하는 경우,보다 표적화 된 전처리 방법이 필요할 수있다. 예를 들면 : 1. 트리클로로 아세트산 또는 과염산을 사용하여 혈장 단백질을 침전시킨 다음 상청액을 복용하여 후속 처리. 2. PH 값을 약한 알칼리도로 조정하여 표적 약물을 제거한 다음 추출 및 정제를 위해 유기 용매를 첨가하십시오.

혈장 샘플 전처리는 생의학 연구, 약물 분석 및 임상 진단의 필수 부분입니다. 적절한 전처리 방법을 채택함으로써, 우리는 혈장에서 간섭 물질을 효과적으로 제거하거나 줄이고, 목표 분석 물을 보호하고, 강화시켜 후속 실험 분석을위한 고품질 샘플을 제공 할 수 있습니다.