단백질을 추출하는 자기 비드

자기 비드 추출 방법은 최첨단 및 우수한 단백질 정제 기술이며, 비교할 수없는 효율성과 특이성을 위해 생물학적 과학 연구 및 생명 공학 분야에서 독특합니다. 그것은 복잡한 생물학적 매트릭스에서 단백질의 정확한 포획 및 효율적인 분리를 달성하기 위해 자기 비드의 표면에 특수 리간드 사이의 상호 작용을 사용하여 표적 단백질을 사용합니다.

1. 자기 비드에 의한 단백질 추출의 원리

자기 비드는 일반적으로 자철석으로 만들어진 자기 코어와 표면 (예 : 아가 로스, 폴리 비닐, 실리카 등)을 덮는 다른 재료로 구성됩니다. 이들 표면 물질은 특이 적 친화도 리간드 (예 : 니켈 -NTA 리간드)에 결합 한 다음 특정 태그 (예 : 그의 태그, Strep 태그 등)와 단백질과 상호 작용할 수있다. 자기장의 작용 하에서, 단백질에 결합 된 자기 비드는 단백질의 정제를 달성하기 위해 혼합물로부터 빠르게 분리 될 수있다.

2. 자기 비드에 의해 단백질을 추출하기위한 단계

1. 자기 비드 전처리 : 자기 비드를 철저히 매달고, 적절한 양의 자기 비드를 가져 가서 원심 분리 튜브에 넣고, 결합/세척 완충액을 첨가하고, 불순물 및 자기 비드 표면에서 비특이적 결합을 제거합니다.

2. 샘플 준비 : 실험 요구에 따라 적절한 생물학적 샘플 (예 : 세포 용 해물, 조직 추출물 등)을 선택하고 표적 단백질을 방출하기 위해 적절한 치료를 수행합니다.

3. 자기 비드는 단백질에 결합한다 : 전처리 된 자기 비드는 샘플에 첨가되고, 자기 비드의 표면에있는 리간드는 배양에 의해 표적 단백질에 결합한다. 이 단계에서, 인큐베이션 시간 및 온도 조건은 실험의 특정 상황에 따라 최적화되어야한다.

4. 자기 분리 : 자기장의 작용 하에서, 자기 스탠드에 결합 된 자기 비드는 자기 스탠드에 흡착되어 결합되지 않은 불순물로부터 분리된다. 이때, 상청액은 폐기 될 수 있고 자기 비드 단백질 복합체를 유지할 수있다.

5. 세척 : 세척 완충제를 사용하여 자기 비드-단백질 복합체를 여러 번 씻어 비 종종 결합 된 불순물을 제거합니다.

6. 용리 : 적절한 용리 완충액 (예 : 낮은 pH 완충액, SDS 완충기 등)을 사용하여 자기 비드로부터 표적 단백질을 피하십시오. 현재, 정제 된 단백질을 얻기 위해 용리액을 수집합니다.

3. 자기 비드에 의한 단백질 추출의 장점

1. 강한 특이성 : 자기 비드 표면의 리간드와 표적 단백질 사이의 상호 작용은 매우 특이 적이며, 이는 정제 과정의 정확성을 보장 할 수 있습니다.

2. 작동하기 쉬운 : 복잡한 원심 분리 또는 여과 단계없이 자기 분리 과정이 빠르고 간단하여 정제 효율을 크게 향상시킬 수 있습니다.

3. 작은 샘플 손실 : 자기 비드의 입자 크기는 작고 제어하기 쉽기 때문에 정제 과정에서 샘플의 손실을 최소화 할 수 있습니다.

4. 우수한 호환성 : 자기 비드 방법은 다양한 발현 시스템 및 샘플 유형과 호환되며 다른 크기 및 유형의 단백질 정제 요구 사항에 적합합니다.

4. 주목할만한 것들

1. 단백질 변성 또는 분해를 방지하기 위해 추출 과정 전체에 걸쳐 저온 작동을 유지해야합니다.

2. 자기 비드의 양 및 배양 조건은 최상의 정제 효과를 얻기 위해 실험의 특정 조건에 따라 최적화되어야한다.

3. 정제 된 단백질의 순도와 회복을 보장하기 위해 세척 및 용리 단계를 완전히 수행해야한다.

과학 기술의 지속적인 발전과 교차 융합으로, 자기 비드 방법 단백질 추출 기술도 지속적으로 반복되고 최적화되고 있습니다. 새로운 재료의 도입, 표면 수정 기술의 혁신 및 자동화 장비의 연구 개발은 모두이 기술에 새로운 활력과 가능성을 주입했습니다.